​SOP文件 | 李斯特菌属检验操作规程

1 目的

规范李斯特菌属检验操作规程，确保检验结果准确可靠。李斯特菌属包括产单核细胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、斯氏李斯特菌等菌种，其中只有产单核细胞李斯特菌对人和动物致病。

2 标本类型

血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。

3 鉴定

3.1 形态染色：革兰阳性小杆菌。

3.2 培养特征：在血琼脂平板上35℃培养18 ~ 24小时，形成较小、圆形、光滑而有狭窄β-溶血环的菌落。

3.3 生化反应：触酶试验阳性，分解葡萄糖，不分解蔗糖、木糖、甘露醇，甲基红、VP和CAMP试验阳性，吲哚、脲酶和硝酸盐还原试验阴性。

3.4 鉴别要点

3.4.1 本菌属特征：革兰阳性短杆菌，菌落较小，有狭窄的β-溶血环，25℃时有动力，37℃时无动力，触酶、CAMP试验阳性，分解葡萄糖。

3.4.2 产单核细胞李斯特菌与粪肠球菌的鉴别：两者均具有耐盐、耐碱耐胆汁等特点，但可通过触酶试验加以鉴别。

3.4.3 产单核细胞李斯特菌与无乳链球菌的鉴别：两者CAMP试验均为阳性，但产单核细胞李斯特菌触酶试验阳性，无乳链球链触酶试验阴性。

3.5 操作步骤

3.5.1 涂片染色：观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。

3.5.2 触酶试验：参见《触酶试验操作规程》。

3.5.3 鉴定：从血琼脂平板上挑取纯菌落，用细菌鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。

4 药敏

参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S19最新版本文件。

5 质量控制

见《质量管理程序》。

6 检验结果解释与分析

本菌容易认为是污染的杂菌（类白喉杆菌）而丢弃。幼龄培养呈革兰阳性，48小时后多转为革兰阴性。因此当遇到25℃培养有动力的杆菌，而按照革兰阴性杆菌鉴定不符时，应考虑到李斯特菌的可能。

7 临床意义

产单核细胞李斯特菌在自然界分布很广，土壤、水、人和动物粪便中均可存在，常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增多症，也可引起脑膜炎、菌血症等。

8 鉴定流程

9 相关文件及记录表格

中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物领域的指南.2008

叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006

ISO15189：2007医学实验室—质量和能力认可准则.2007

JYK-***-WSW***  质量管理程序

JYK-***-WSW***  药物敏感试验标准操作规程

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